ارزیابی آنتی بادی ضد آنتی ژن لکوسیت انسانی (HLA) قبل ازپیوند اعضا توپر

 یکی از بررسی‌های قبل از پیوند عضو ارزیابی وجود آنتی‌بادی ضد آنتی‌ژن لکوسیت انسانی کلاس I & II  (panel reactive antibody =PRA)  میباشد. این آزمایش در بیمارانی که سوابق بارداری، دریافت خون و یا پیوند قبلی داشته‌اند اهمیت بیشتری دارد. این بررسی معمولا به چندین روش انجام می‌شود که در ذیل به دو مورد اشاره می‌کنیم:

1. روش CDC یا Complement Dependent Cytotoxicity  :

روش سیتوتوکسیسیتی وابسته به کمپلمان که در برخی دیگر از آزمایشات هم استفاده می‌شود اتصال آنتی بادی‌های فعال کننده ی کمپلمان در سرم بیمار به لنفوسیت‌های تهیه شده از پولد انسانی و به دنبال آن افزودن کمپلمان و بررسی سلول‌های تخریب شده با استفاده از رنگ ائوزین می‌باشد. با توجه به اینکه در روش CDC نتایج به واسطه چشم بیننده و بررسی میکروسکوپی صورت می‌گیرد، لذا حساسیت موثر در مقایسه با روش های دیگر چندان بالا نمی‌باشد. روش CDC مستعد نتایج منفی کاذب می‌باشد. برای مثال تیتر پایین آنتی بادی منجر به فعال شدن کمپلمان نمی‌گردد و یا برخی از زیر کلاس‌های آنتی بادی در شرایط in-vitro   قادر به تثبیت کمپلمان نمی‌باشند در حالی که در بدن از طریق گیرنده FC رد پیوند را واسطه گری می‌کند.

2. روش  : Flowcytometry PRA

در روش فلوسایتومتری آنتی بادی‌های اختصاصی به سلول متصل شده و سپس آنتی‌بادی ثانویه IgG اضافه می‌شود بدین ترتیب مقادیر بسیار کم آنتی بادی نیز تشخیص داده می‌شود. در این روش امکان اضافه کردن آنتی بادی‌های اختصاصی لنفوسیت‌های T وB به عنوان سلول‌های دارای آنتی‌ژن‌های HLA کلاس I &II  با رنگ‌های فلورسنت دیگر وجود دارد و این امر موجب می‌شود آنتی بادی‌های مربوطه از یکدیگر قابل تفکیک باشند. در این روش اساس شناسایی استفاده از آنتی بادی‌های ثانویه علیه FC IgG یا Fab کونژوگه به مواد فلورکروم می‌باشد. این روش نسبت به روش  CDC از دقت و حساسیت بالاتری برخوردار است.

علاوه بر دو روش مذکور تکنیک‌های پیشرفته‌تر با حساسیت بالاتر از جمله روش Single assay  جهت ارزیابی آنتی‌بادی های  HLA وجود داشته که قادر به تشخیص آنتی بادی های اختصاصی زیر گروه های آنتی ژنی HLA می باشد.

دپارتمان تخصصی فلوسایتومتری آزمایشگاه نوبل اصفهان