آخرین نظر

مهمان (سجاد)
با سلام وخسته نباشید اگر هموگلوبین نوعA از حد معمول کمتر باشد(مثلا 94.5) و همچنین نوع B از حد معمو...

جدیدترین مطالب

IMAGE
تشخیص ژنهای KRAS.BRAF.
دوشنبه, 29 تیر 1394
  آزمایش تشخیص ژنهای KRAS.BRAF.P13K & NRAS.iKRAS بااستفاده از تکنولوژی کلینیکی Array می توان  20 موتاسیون سوماتیک رایج در... ادامه مطلب...
IMAGE
آزمایش تشخیص میکرو ارگانیسم های مولد سپسیس SeptiBacter
دوشنبه, 29 تیر 1394
آزمایش تشخیص میکرو ارگانیسم های مولد سپسیس SeptiBacter بااستفاده از تکنولوژی کلینیکی Array  می توان باکتری هایی گرم... ادامه مطلب...
IMAGE
بیماری موکوپلی ساکاریدوز
سه شنبه, 17 تیر 1393
موکوپلی ساکاریدوز  یا MPS , بیماری ارثی به دنبال جهش در ژن آنزیم های مربوط به تجزیه موکوپلی ساکاریدها میباشد که... ادامه مطلب...
IMAGE
استفاده از سلولهای بنیادی در درمان دیابت
یکشنبه, 20 بهمن 1392
  دیابت چیست؟ بیماری قند و یا به عبارت دیگر دیابت، بیماری مزمنی است كه در نتیجه اختلال در تولید و عملكرد... ادامه مطلب...

فلوسایتومتری

فلوسایتومتری:
فلوسایتومتر دستگاهی است که خصوصیات سلول را همانطور که در حال جریان درون یک مایع است ِ، اندازه گیری می کند. نام دیگر روش فلوسایتومتری  FACS است (Felorcent Activated Cell Sorting ) در واقع سلول هایی که با ماده ی فلورسنت نشاندار شده اند، دستگاه آن ها را اسکن می کند.


مزایای روش فلوسایتومتری:
1-    بررسی چندین خاصیت سلول بطور همزمان.(سایز ،گرانولوسیتی...)
2-    اگر دستگاه به sorter مجهز باشد میتوان سلول های مورد نظر را از هم جدا کرد.
3-    در مدت زمان کوتاهی می توان بسیاری از خصوصیات سلول را بررسی کرد.
اصل فلو سایتومتری بر اساس فلورسنت است . به سلول نشاندار به ماده ی فلورسنت پرتو تابانده می شود و پرتوی بازتابی از سلول اندازه گیری می شود(مانند میکروسکوپ فلورسنت).
اما فلوسایتومتری نسبت به میکروسکوپ فلورسنت محاسنی دارد از جمله اینکه خود دستگاه اطلاعات آماری می دهد، سلول ها شمارش می شوند ، می توان سلول زنده را بررسی کرد ، درمدت زمان کوتاهی می توان اطلاعات مورد نظر را بدست آورد، در مورد بررسی میزان بیان یک مارکر (کم یا زیاد بودن آن در هر سلول ) در میکروسکوپ فلورسنت به صورت کیفی( +← ++++ ) بیان میشود اما اختلافات کوچک فلورسنت در دستگاه فلوسایتومتر به طور دقیق به صورت عددی نشان داده می شود. و اینکه  میکروسکوپ فلورسنت user develope  است و به تشخیص فرد کاربر بستگی دارد.
ماده ی فلورسنت در یک محلول موجب تحریک می شود و بعد از تحریک، نوری با طول موج متفاوت از خود ساطع می کند. تحریک با نور موجب افزایش انرژی الکترون و رفتن به مدار بالا میشود، الکترون دربرگشت به مدار پایین باعث ساطع شدن رنگ خاصی می شود.
از جمله رنگ های فبورسنت می توان به FITC وPE اشاره نمود.
هر کدام از این مواد فلورسنت، رنگ خاصی ساطع می کنند و توسط  فیلتر های خاصی detect  می شوند
کاربردهای فلوسایتومتری:
1: ساده ترین و فراوانترین کاری که می توان با فلوسایتومتری انجام داد تشخیص فنوتیپ سلول با استفاده از مارکر های سطح سلولی است. علاوه بر بیان یک ماکر میزان بیان آن مارکر را نیز می توان  تعیین کرد.
2: اندازه گیری بیان یک ماده در سلول مثل IL-12 در درون سلول.
برای تعیین میزان اینترلوکین با روش الایزا ، تنها می توان میزان آن را در سوپرناتانت محیط کشت اندازه گرفت و دیگر نمی توان تعیین کرد که کدام یک از رده های سلولی میزان بیشتر و کدام رده میزان کمتری تولید کرده اند . اما با روش فلوسایتومتری ، اگر از فلو دو رنگ استفاده کنیم ( یک انتی بادی علیه CD4 و یکی علیه IL-17 ) می توان تعیین کرد که کدام رده ی سلولی بیشتر وکدام میزان کمتری اینترلوکین تولید کرده اند.
3: با کمک فلوسایتومتری می توان سیکل سلول و میزان تکثیر سلولی را نیز اندازه گرفت. ( چون در طی تکثیر سلولی میزان DNA زیاد می شود .
چندین رنگ فلور سنت وجود دارند که قابلیت اتصال به DNA را دارند. مهمترین ان ها که کاربرد گسترده ای دارد پروپیدیوم یدید است (PI) . PI در بین زنجیره های دو رشته ای اسید نوکلیک قرار می گیرد و توسط لیزر آرگون در طول موج 488 nm  تحریک می شود و نور فلورسانس قرمز را از خود پراکنده می سازد و چون از ورود این رنگ توسط سلول های زنده به داخل جلوگیری می شود ، یک راه تشخیص سلول های زنده از مرده ، استفاده از همین نوع رنگ است.
4: میزان RNA : محتوای DNA و RNA را می توان به طور هم زمان در سلول هایی که نفوذ پذیر شده اندبا نشان دار کردن آن ها به وسیله ی آکریدین نارنجی Acridin orange (AO) اندازه گیری نمود.
5: میزان پروتئین : با استفاده از آنتی بادی های اختصاصی نشان دار میتوان پروتئین مورد نظر را اندازه گیری کرد. محتوای کل پروتئین سلول را می توان با رنگامیزی سلول های فیکس شده تخمین زد. این رنگها می تواند SulfoRodamin 110 ویا FITC باشند.
6: تعیین فعالیت آنزیم های درون سلولی: یکی از کاربردهای فلوسایتومتری  تعیین کینتیک آنزیم های داخل سلولی است. مثلا برای تعیین فعالیت پروتئازی ، رودامین به سوبستراهای پپتید های مختلف می چسبد که با فعالیت پروتئازی این رودامین آزاد می شود و از این طریق می توان فعالیت پروتئازی را اندازه گرفت.
7: قابلیت نفوذپذیری غشا: تغییرات نفوذپذیری غشا را می توان با استفاده از رنگ های که به DNA متصل می شوند بررسی نمود کثل اتیدیوم بروماید EB ، SYTO ،PI ، Yo-PRO و بعضی از این رنگ ها در سلول سالم و دست نخورده به علت فعالیت غشای سلولی نمی توانند وارد شوند که  در صورت ورود به سلول نشان دهنده ی افزایش قابلیت نفوذ غشا هستند.
از دیگر کاربرد های فلوسایتومتری مطالعه ی اکسیداتیوهای داخل سلولی و سنجش PH داخل سلولی و آنالیز و جداسازی کروموزوم ها ، مرگ برنامه ریزی شده ی سلول ، تشخیص تومور، کنترل پیوند اعضا، تشخیص باکتری، شناسایی اسپور قارچ/پروتوزوئرها/ ویروس / آزمون اثرداروها، میکربیولوژی موادغذایی، داروسازی، تعیین جنسیت سلول است.
آزمایشگاه نوبل مجهز به فلوسیتومتر می باشد و می تواند خدمات ارزنده ای را در این زمینه به پزشکان محترم ارائه نماید.

نظر خود را اضافه کنید.

مهمان
یکشنبه, آگوست 02, 2015
0 حرف
شرایط و قوانین.
  • هیچ نظری یافت نشد
  1. مطالب تصادفی
  2. مطالب مرتبط
IMAGE
تشخیص ژنهای KRAS.BRAF.
  آزمایش تشخیص ژنهای KRAS.BRAF.P13K & NRAS.iKRAS بااستفاده از تکنولوژی کلینیکی Array می توان  20 موتاسیون سوماتیک رایج در ژنهای KRAS.BRAF.P13K & NRAS.Ikras را...
IMAGE
آزمایش تشخیص میکرو ارگانیسم های مولد سپسیس SeptiBacter
آزمایش تشخیص میکرو ارگانیسم های مولد سپسیس SeptiBacter بااستفاده از تکنولوژی کلینیکی Array  می توان باکتری هایی گرم مثبت ، منفی و قارچ های که...
IMAGE
آزمایش تشخیص باکتری هایی مولد اسهال عفونی Enterobacter
آزمایش تشخیص باکتری هایی مولد اسهال عفونی Enterobacterبااستفاده از تکنولوژی کلینیکی Array می توان باکتری هایی که باعث اسهال عفونی می شوند را...
IMAGE
آزمایش تشخیص هرپس ویروس های انسانی و انترو ویروس ها Entherpex
آزمایش تشخیص هرپس ویروس های انسانی و انترو ویروس ها Entherpex بااستفاده از تکنولوژی کلینیکی Array   می توان علاوه بر تشخیص هرپس ویروسها (HHV 1-8)،...
IMAGE
آزمایش تشخیص باکتری هایی عامل عفونت ناحیه تنفسی Pneumo bacteria
آزمایش تشخیص باکتری هایی  عامل عفونت ناحیه تنفسی  Pneumo bacteria بااستفاده ازتکنولوژی کلینیکی Array  می توان باکتری هایی که باعث عفونت تنفسی می...

اشتراک در خبرنامه

لصفا ایمیل و نام خود را وارد کنید تا از جدیدترین مطالب سایت آگاه شوید !